1、移植的时间

刘伟国等通过脑外伤后不同时间移植神经干细胞的疗效对比研究，认为脑缺血损伤后24小时移植的神经干细胞在大鼠体内存活率最高，原因是缺血损伤导致各种兴奋性氨基酸、钙离子、氧自由基等的大量生成以及炎症细胞的局部浸润，这些都是移植细胞存活的不利因素，而伤后24小时内各种不利因素都处于高峰期，一直到24小时以后才逐渐恢复。在48小时进行神经干细胞移植，效果也不是非常理想，其原因可能是脑外伤12小时以后，各种神经营养因子分泌也逐渐下降，而神经营养因子对于神经干细胞的增殖、分化和迁移都起到重要的作用。另外，受伤时间越长，损伤灶内胶质瘢痕结构就越紧密，这不利于神经干细胞生长，同时也使其更难参与修复过程。因此，在受伤后24小时进行神经干细胞移植是比较适合的时机。阻断右侧大脑中动脉后，在脑室和脑梗死灶观察到不同时间点移植的Brdu阳性的神经干细胞向缺血周边区明显迁移，特别是缺血24小时后移植的细胞存活率、增殖程度和定向迁移都更加明显，而这一时间窗刚好与这些细胞因子分泌高峰相吻合，因此考虑脑缺血后分泌的营养因子和趋化因子在缺血24小时较多，可能对随后移植细胞的存活、增殖和迁移有重要的作用。

 

2、移植的免疫因素

传统观念认为，神经干细胞是一种处于相对原始的细胞，具有低免疫源性的特性，理论上不表达成熟细胞抗原，其抗原性较弱，因此外源性的神经干细胞在移植后可能仅导致轻微的排斥反应，甚至无排斥反应。有实验证实新分离的和传代的神经干细胞的细胞膜表面均有MHCΙ类和Π类分子的表达，神经干细胞能在体外诱导淋巴细胞的增殖反应，说明其仍存在一定的免疫源性。因此，在缺血性脑损伤神经干细胞移植治疗中，有必要使用免疫抑制剂。目前，多数学者认为免疫抑制剂可减少排斥反应，增加移植物的存活概率和存活时间。但是免疫抑制剂也可能是有害的，因为它能抑制免疫细胞进入缺血区，而免疫细胞进入缺血区不仅可以清除细胞碎片，还有利于传递神经营养因子。所以，对免疫抑制剂的使用还需进一步讨论。

 

3、神经干细胞移植治疗脑卒中的临床应用

目前，神经干细胞移植在治疗动物缺血性脑损伤的方面取得了令人振奋的结果，但将其应用到人体仍存在诸多问题。与其他神经系统疾病的细胞移植治疗相比，缺血性脑损伤的细胞治疗需要植入多种不同的细胞。例如大脑中动脉栓塞所造成皮质、基底节、海马等部位的梗死，导致神经元、少突胶质细胞、星形胶质细胞和血管内皮细胞的坏死与凋亡。因此，选择哪一种或几种细胞移植对于治疗的成功至关重要。目前还需进行大量的临床前期工作，以便为临床试验提供理论基础。目前，临床神经干细胞移植研究比较少，杨清成等采用取自流产胎儿的脑组织的神经干细胞，经体外培养后行腰椎穿刺将细胞移植入59例脑卒中患者的蛛网膜下腔，随访观察24个月，结果59例患者的欧洲卒中量表评分和生活功能评分均较移植前有明显提高。张儒有等采用蛛网膜下腔移植的方法将流产胎儿的脑组织的神经干细胞移植给50例脑卒中患者，采用美国功能独立性测评评分对患者术前及术6个月进行评定，结果所有患者移植后的评分高于移植前。上述研究都表明神经干细胞的移植治疗缺血性脑损伤取得了一定的临床疗效。